Western Blot 实验教程 面向首次做WB者，文章梳理从细胞/组织总蛋白制备、SDS-PAGE、湿转、封闭、抗体孵育到ECL显影和灰度分析的主线。核心是理解原理并控制细节：SDS-PAGE按分子量分离，转膜须胶靠黑膜靠红，二抗按一抗宿主选择，磷酸化用BSA封闭；样品低温加抑制剂，BCA定量后等量上样，曝光多档，仅用未饱和条带定量并以内参归一化。WB可比较蛋白有无和相对表达变化，不能单独证明定位、结合或精确倍数。新手应记录参数、一次只改一个变量，用阳性对照和丽春红排查失败。 科研记录 #实验教程 2026-09-22 26 0 0
骨肉瘤细胞传代操作教程（143B&U-2OS&K7M2） 143B、U-2 OS与K7M2骨肉瘤细胞传代要点：汇合度80%–90%、对数生长期传代，宁早勿晚，连续培养不超过20–30代。三株培养基不可互换，U-2 OS用McCoy’s 5A，143B用EMEM并补BUdR，K7M2用DMEM。无菌下经PBS润洗、胰酶消化、镜下判断终点、培养基终止、离心或稀释、台盼蓝计数后分瓶；U-2 OS胰酶敏感，K7M2消化需5–15分钟且勿拍打摇晃。还应防支原体、记录代次，人源细胞做STR鉴定。 科研记录 #实验教程 2026-09-11 30 0 0
Vercel 零成本部署 Umami 网站统计系统 本文介绍使用 Vercel 免费额度与 Neon 免费 PostgreSQL 自托管 Umami 网站统计系统的完整流程。方案适用于个人博客、独立站等非商业小流量站点，无需自购服务器和数据库；但“零成本”不含自定义域名费用，且平台免费规则可能变化。部署步骤包括：Fork Umami 仓库、Vercel 导入并创建 Neon 数据库、重新部署、修改默认密码、添加网站并嵌入追踪代码。Umami 可统计页面浏览量、访客数、来源、设备、自定义事件和 UTM 参数，支持多站点管理、只读分享与 API。文章还涵盖自定义域名绑定、Halo 插件接入文章统计、常见排错、更新维护与数据备份建议。 技术分享 #实用工具 2026-08-31 47 0 0
【看番教程】动漫资源哪里找？（BT下载、在线观看与正版平台） 本文系统梳理动漫资源站点，分为BT下载/RSS订阅、在线观看、正版平台三类。BT下载类以Nyaa（全球最大动漫BT索引）与蜜柑计划（中文圈自动化追番标杆）构成双核，另有天雪（压制组首发）、末日动漫AcgnX（华语最全检索）、AniBT等差异化站点。在线观看类中AGE动漫为综合首选，动漫共和国与稀饭动漫主打高画质快更新，Animeko面向技术型用户。正版平台按地区选型：大陆选Bilibili，海外选Crunchyroll，港澳台选巴哈姆特动画疯。文章建议采用“正版+BT”双轨制，并提醒在线站存在版权风险、域名变动与安全风险，应收藏导航页并甄别资源。 冻鳗糕手 #看番教程 #windows 2026-08-13 68 0 0
Docker部署 Clash 代理完整指南 文章讲解 mihomo（原 Clash.Meta）的 Docker 部署全流程：用 Compose 编排内核与 MetaCubeXD 面板双容器，数据卷挂载 ./data，容器内配置路径为 /root/.config/mihomo。通过 proxy-providers 实现多订阅并存、定时更新、独立健康检查及自动选优。面板无状态，由浏览器直连内核 API，无需持久化。安全方面需设置强 secret、限制 9090 暴露。相比二进制部署，Docker 提供环境隔离、一键升级回滚与易迁移。适合自建代理、管理多订阅的用户。 技术分享 #docker #NAS教程 #实用工具 2026-08-05 2676 0 0
你的Codex一直Reconnecting？附解决方案 Codex 在终端中反复出现“Reconnecting”且最终超时，通常不是账号或安装问题，而是其默认的 WebSocket 流量未被代理软件接管。系统代理对终端应用常不生效，导致 WSS 握手失败并重试 5 次。文章提供优先方案：在用户主目录的 `~/.codex/.env`（Windows 为 `C:\Users\<用户名>\.codex\.env`）中写入 `HTTP_PROXY`、`HTTPS_PROXY` 及对应小写变量，并设置 `NO_PROXY` 指向本地地址；代理端口应使用 HTTP 或 Mixed 端口，而非 SOCKS5 端口。修改后需彻底重启 Codex 生效；回滚只需删除这些变量。备选方案包括禁用 WebSocket 的 HTTP-only provider、Windows 系统环境变量，以及 TUN 模式兜底。该方法仅影响 Codex，改动小且可逆。 技术分享 #AI Agent 2026-07-28 151 0 0
Imagine Plus：轻量的开源图片压缩格式转换神器 Imagine Plus 是基于 Tauri 2 重构的开源跨平台图片优化工具，安装包最小仅 4.33 MB（Windows），显著小于原版 Electron 构建。支持 JPEG、PNG、WebP、AVIF、HEIC、BMP 六种输入格式与四种输出格式的互转，集成压缩、格式转换及批量调整尺寸功能（SIMD 加速 Lanczos3 算法）。采用 Rust 原生编解码器栈（mozjpeg、libimagequant、ravif 等），输出质量高、处理速度快。提供对比模式、元数据保留、渐进式编码等实用特性，并可配置并发数。适合网站素材优化、HEIC 照片批量转 JPG 等场景。最新版本 v0.10.2，开源协议因依赖 libimagequant 实际遵循 GPL-3.0，首次安装需手动绕过 Windows SmartScreen 拦截。 技术分享 #实用工具 #windows 2026-07-27 52 0 0
Oh My PPT：一句话生成 HTML 演示稿的本地 AI 工具 Oh My PPT 是一款开源、纯本地运行的 AI PPT 生成与编辑桌面工具（Apache 2.0 许可，v2.1.0）。用户只需描述需求，AI 自动规划大纲、配色与排版，生成可自由编辑的 HTML 幻灯片，无需注册，数据全在本地。核心功能包括：一句话/多轮对话创建、上传文档或 PPTX 导入、对话式修改、可视化拖拽、一键美化；支持 70+ 风格、LaTeX 公式、可编辑图表；可导出 PDF、PNG、MP4、可编辑 PPTX 及单文件 HTML。模型支持 DeepSeek、GPT、Claude 等云端 API 及本地 Ollama 离线运行。Windows 安装需处理 SmartScreen 提示，首次使用必须配置 AI 模型。项目解决了初稿排版耗时的痛点，兼顾灵活性与数据安全，适合汇报、课件、路演等场景。 技术分享 #实用工具 #windows #AI Agent 2026-07-24 36 0 0
Codex用中转站无法生图？这个SKILL让你重获生图能力 针对中转站移出 `gpt-image-2` 导致 Codex 无法生图的问题，开源项目 `codex-image2-skill` 通过自定义 Skill 直接调用 OpenAI 兼容的图片接口，恢复“一句话生成配图”体验。项目近期用 Go 重构为原生可执行文件，零依赖、下载即用，支持 Windows 和 macOS 四平台。核心流程：从环境变量读取 API 地址和密钥，调用 `/v1/images/generations` 或 `/v1/images/edits`，保存图片并让 Codex 检查展示。功能包括文生图、图片编辑、局部编辑、JSONL 批量生成、智能重试和覆盖保护，密钥仅从环境变量读取且脱敏。用户可通过指令 `/codex-image2` 调用，支持 CLI 高级用法。常见问题包括重启 Codex 解决环境变量未生效、接口超时可降低质量或尺寸。该项目解决了实际痛点，安全规范，适合日常生图与自动化工作流。 技术分享 #AI Agent 2026-07-18 364 0 0
Bili23 Downloader：开源免费的跨平台 B 站视频下载神器 Bili23 Downloader 是一款基于GPL-3.0协议的开源免费跨平台B站视频下载工具，支持Windows、Linux和macOS。它无广告、无内购，具备多线程加速、断点续传、异常自动重试等功能。该工具可解析投稿视频、番剧、课程、收藏夹等十几种链接类型，支持批量处理。下载画质最高可达8K、4K、HDR及杜比视界，音质支持Hi-Res无损和杜比全景声。软件可自动下载弹幕、字幕和封面，并生成Kodi/Jellyfin/Emby标准的NFO元数据文件，便于搭建本地媒体库。登录账号后可获取高清画质，但软件不会绕过付费墙，大会员内容需相应账号权限。下载内容仅供个人非商业学习研究使用，严禁二次分发。 技术分享 #实用工具 #windows 2026-07-16 34 1 0
